doc_act

МУК 4.1.2924-11 Определение остаточных количеств изопротурона и дифлюфеникана в воде, почве, зерне

Реклама

 

  Скачать документ

 



Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации

 

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ



Реклама

Определение остаточных количеств
пестицидов в сельскохозяйственном
сырье, пищевых продуктах и
объектах окружающей среды

Сборник методических указаний
по методам контроля
МУК 4.1.2907-11; 4.1.2923 - 4.1.2925-11; 4.1.2938-11

Москва • 2011

 



Реклама

1. Разработаны сотрудниками ГНУ Всероссийского НИИ защиты растений Россельхозакадемии.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 2.06.2011 № 1).

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 12 июля 2011 г.

4. Введены в действие с момента утверждения.

5. Введены впервые.



Реклама

СОДЕРЖАНИЕ

 

1. Метрологическая характеристика метода. 3

2. Метод измерения. 4

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы.. 5

4. Требования безопасности. 6

5. Требования к квалификации операторов. 6

6. Условия измерений. 6

7. Подготовка к определению.. 6

8. Отбор проб и хранение. 8

9. Проведение определения. 8

10. Обработка результатов анализа. 10

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений. 10

12. Оформление результатов. 10

13. Контроль качества результатов измерений. 11

14. Разработчики. 12

 

 

 

УТВЕРЖДАЮ

Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный
врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

12 июля 2011 г.

Дата введения: с момента утверждения

 

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ



Реклама

Определение остаточных количеств изопротурона и
дифлюфеникана в воде, почве, зерне и соломе
зерновых культур методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии

Методические указания

МУК 4.1.2924-11

 



Реклама

Настоящий документ устанавливает методику измерения массовых концентраций изопротурона в воде водоемов в диапазоне концентраций 0,001 - 0,01мг/дм3, в зерне в диапазоне 0,005 - 0,1 мг/кг, в почве - 0,01 - 0,1 мг/кг, дифлюфеникана в воде водоемов в диапазоне концентраций 0,001 - 0,01 мг/дм3, в зерне и почве в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг, изопротурона и дифлюфеникана в соломе зерновых в диапазоне 0,02 - 0,2 мг/кг.

Действующее вещество 1: изопротурон.

3-(4-изопропил)-1,1-диметилмочевина (IUPAC).

Брутто формула: C12H18N2О.



Реклама

Молекулярная масса: 206,3.

Химически чистое вещество представляет собой белый кристаллический порошок.

Температура плавления: 158 °С.

Давление пара 3,15•10- мРа (20 °С).

Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода: Kow lgP = 2,5 (20 °С).



Реклама

Растворимость в воде (мг/дм3, 22 °С): 65.

Растворимость в органических растворителях (г/дм3, 20 °С) в метаноле - 75, дихлорметане - 63, ацетоне - 38, бензоле - 5, ксилоле - 4, н-гексане - 0,2.

Очень стабилен к воздействию света, кислот и щелочей. Гидролизуется при нагревании в концентрированной щелочи.

Краткая токсикологическая характеристика: острая оральная токсичность LD50 - 1826 - 2417 мг/кг (крысы), 3350 мг/кг (мыши). При подкожном введении LD50 для крыс более 2000 мг/кг. Ингаляционная токсичность для крыс LС50 превышает 1,95 мг/дм3 (период наблюдения 4 ч). Не раздражает кожу и слизистую глаз у кроликов.

Область применения: селективный системный гербицид, адсорбируемый корнями и листьями растений. Используется для контроля до и после появления однолетних трав и многолетних широколиственных сорняков на озимых и яровых посевах пшеницы, ржи и ячменя с нормой расхода 1,0 - 1,5 кг/га.



Реклама

В России для изопротурона установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД - 0,006 мг/кг/сут.; ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,8 мг/м3; ОДК в воде водоемов - 0,09 мг/дм3; ОДК в почве - 0,05 мг/кг; МДУ в зерне хлебных злаков - 0,01 мг/кг.

Действующее вещество 2: дифлюфеникан.

МУК 4.1.2924-11 Определение остаточных количеств изопротурона и дифлюфеникана в воде, почве, зерне

2',4' - дифтор-2(?, ?, ?-трифтор-м-толилокси)никотинанилид (IUPAC).

Брутто формула: C19H11F5N2О2.

Молекулярная масса: 394,3.

Химически чистое вещество представляет собой белый кристаллический порошок.

Температура плавления: 159 - 161 °С.

Давление пара 4,25•10-3 мРа (25 °С).

Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода: Kow lgP = 4,9 (20 °С).

Растворимость в воде (мг/дм3, 25 °С): < 0,05.

Растворимость в органических растворителях (г/дм3, 20 °С) в ацетоне и диметилформамиде - 100, ацетофеноне и циклогексаноне - 50, изофороне - 35, ксилоле - 20, циклогексане - 2, керосине - менее 10.

На воздухе стабилен вплоть до температуры плавления. При 22 °С очень стабилен в водных растворах при рН 5, 7 и 9. Достаточно устойчив к фотолизу.

Краткая токсикологическая характеристика: острая оральная токсичность LD50 более 2000 мг/кг (крысы), более 1000 мг/кг (мыши), более 5000 мг/кг (кролики). Ингаляционная токсичность для крыс LC50 более 2,34 мг/дм3 (период наблюдения 4 ч). Не раздражает кожу и слизистую глаз у кроликов.

Область применения: гербицид, используемый для постобработки осенних посевов с целью контроля трав и широколистных сорняков. Обычно применяется в комбинации с изопротуроном или другими гербицидами хлебных злаков. Норма расхода 125 - 250 г/га.

В России для дифлюфеникана установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД - 0,01 мг/кг/сут.; ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,6 мг/м3; ОДУ в воде водоемов - 0,15 мг/дм3; ОДК в почве - 0,05 мг/кг; МДУ в зерне хлебных злаков - 0,05 мг/кг.

1. Метрологическая характеристика метода

 

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры

Диапазон измерений, массовая концентрация

Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), ?r, %

Показатель промежуточной прецизионности (относительное среднеквадратическое отклонение в условиях вариации факторов «время», «оператор» в одной лаборатории), ?, %

Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости),

?R, %

Показатель точности* (границы относительной погрешности при вероятности Р = 0,95) ±?, %

Изопротурон

Вода, мг/дм3

 

 

 

 

от 0,001 до 0,01 вкл.

7

8

10

19

Почва, мг/кг

 

 

 

 

от 0,01 до 0,1 вкл.

9

11

13

25

Зерно, мг/кг

 

 

 

 

от 0,005 до 0,05 вкл.

8

9

11

22

св. 0,05 до 0,1 вкл.

6,5

7

9

18

Солома, мг/кг

 

 

 

 

от 0,02 до 0,1 вкл.

6,5

7

9

18

св. 0,1 до 0,2 вкл.

5

6

7

14

Дифлюфеникан

Вода, мг/дм3

 

 

 

 

от 0,001 до 0,01 вкл.

6

7

8

16

Почва, мг/кг

 

 

 

 

от 0,01 до 0,1 вкл.

7,5

9

11

21

Зерно, мг/кг

 

 

 

 

от 0,01 до 0,1 вкл.

7,5

9

11

21

Солома, мг/кг

 

 

 

 

от 0,02 до 0,1 вкл.

7,2

8

10

20

св. 0,1 до 0,2 вкл.

6

7

8

16

*) соответствует расширенной неопределенности Uотн. при коэффициенте охвата k = 2

 

Таблица 2

Полнота извлечения изопротурона и дифлюфеникана,
стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата
для n = 20, Р = 0,95

Аналит

Анализируемый объект

Предел обнаружения, мг/кг (мг/дм3)

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3)

Среднее значение определения, %

Стандартное отклонение, S

Доверительный интервал среднего результата, ± %

Изопротурон

Вода

0,001

0,001 - 0,01

91,8

8,2

3,8

Почва

0,01

0,01 - 0,1

89,2

13,0

6,1

Зерно

0,005

0,005 - 0,1

90,5

10,5

4,9

Солома

0,02

0,02 - 0,2

95,9

6,8

3,2

Дифлюфеникан

Вода

0,001

0,001 - 0,01

89,1

2,3

1,1

Почва

0,01

0,01 - 0,1

84,9

9,9

4,7

Зерно

0,01

0,01 - 0,1

88,5

9,4

4,4

Солома

0,02

0,02 - 0,2

82,1

8,3

3,9

2. Метод измерения

 

Методика основана на определении изопротурона и дифлюфеникана методом ВЭЖХ с использованием УФ-детектора после их экстракции из образцов смесью ацетона с водой и очистки экстракта методом последовательной твердофазной экстракции на патронах Диапак С16 и Силикагель 60.

Идентификация изопротурона и дифлуфеникана проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений

Жидкостный хроматограф «ACQUITY» фирмы «Waters» с быстросканирующим УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки

 

Весы аналитические BЛA-200

ГОСТ 24104-2001

Весы технические ВЛКТ-500

ГОСТ 24104-2001

Колбы мерные на 10, 100, 1000 см3

ГОСТ 23932-90

Микродозаторы Ленпипет переменного объема от 200 до 1000 мм3 и от 1 до 5 см3, вид климатического исполнения УХЛЧ.2

ГОСТ 50444

Пипетки градуированные

ГОСТ 29227-91

Цилиндры мерные на 50, 100, 500 и 1000 см3

ГОСТ 23932-90

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Ацетон, чда

ГОСТ 2603-79

Ацетонитрил для ВЭЖХ, «В-230НМ» или хч

ТУ 6-09-3534-87

Вода дистиллированная

ГОСТ 6709-79

Гексан, хч

ТУ 2631-003-05807999-989

Дифлюфеникан с содержанием основного вещества 99,5 % (Sigma-Aldrich)

 

Изопротурон с содержанием основного вещества 99,0 % (Sigma-Aldrich)

 

Этилацетат, хч

ГОСТ 22300-76

Допускается использование реактивов квалификацией не ниже указанных.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Аналитическая колонка ACQUITY UPLC ВЕН С18 (100?2,1) мм, 1,7 мкм (Waters)

 

Бидистиллятор

 

Баня ультразвуковая «Сапфир», УЗВ-1,3

ГОСТ Р МЭК 60335-2-15-98

Вакуумный манипулятор для работы с патронами для твердофазной экстракции (Waters, кат. № WAT 200677)

 

Воронка Бюхнера

ГОСТ 0147

Воронки лабораторные В-75-110

ГОСТ 25336-82

Колба Бунзена

ГОСТ 5614-75

Колбы круглодонные на шлифах КШ50 14/23 ТС

ГОСТ 10384-72

Колбы круглодонные на шлифах КШ250 29/32 ТС

ГОСТ 10384-72

Колбы плоскодонные на шлифах КШ 250 29/32 ТС

ГОСТ 25336-82

Мельница ножевая РМ-120 и лабораторная зерновая ЛМЗ

ТУ 1-01-0593-79

Патроны Диапак С16 (БиоХимМак), 0,4 г

ТУ 4215-002-05451931-94

Патроны, заполненные силикагелем 60 (Merck), 0,5 г

 

Ротационный вакуумный испаритель BuchI R 205 (Швейцария)

 

Фильтры бумажные «красная лента»

ТУ 6.091678-86

Допускается использование другого вспомогательного оборудования с техническими характеристиками не хуже указанных.

4. Требования безопасности

 

4.1. При проведении работы необходимо соблюдать требования техники безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1.005, 12.1.007). Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.

4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

5. Требования к квалификации операторов

 

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

 

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

• процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

• выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

7.1. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа колонку (Acquity ВЕН С18) кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 - 0,2 см3/мин) до стабилизации нулевой линии.

7.2. Приготовление растворов

7.2.1. 0,005 Мраствор ортофосфорной кислоты: (0,5 ± 0,01) г 98 % ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм3, растворяют в биднстиллированной воде и доводят объем до метки.

7.2.2. Для приготовления подвижной фазы 1 смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 40:60 по объему, используя мерные цилиндры.

7.2.3. Для приготовления подвижной фазы 2 смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 65:35 по объему, используя мерные цилиндры.

7.2.4. Приготовление элюентов для твердофазной экстракции.

Элюент 1. В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 5 см3 этилацетата и доводят объем до метки гексаном. Перемешивают. Элюент хранят в вытяжном шкафу и используют свежеприготовленным.

Элюент 2. В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 20 см3 этилацетата и доводят объем до метки гексаном. Перемешивают. Элюент хранят в вытяжном шкафу и используют свежеприготовленным.

Элюент 3. В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 50 см3 этилацетата и доводят объем до метки гексаном. Перемешивают. Элюент хранят в вытяжном шкафу и используют свежеприготовленным.

7.3. Приготовление основных и градуировочных растворов

7.3.1. Основные растворы 1 и 2 с концентрацией 0,5 мг/см3: точные навески изопротурона и дифлуфеникана (50 ± 0,5) мг помещают в мерные колбы вместимостью 100 см3, растворяют в ацетонитриле и доводят объемы до метки тем же растворителем.

Градуировочные растворы изопротурона и дифлуфеникана с концентрациями 0,05, 0,1, 0,2, 0,5, 0,75 и 1,0 мкг/см3 готовят методом последовательного разбавления основных растворов 1 и 2 по объему, используя соответственно подвижные фазы 1 и 2.

7.3.2. Раствор № 1 с концентрацией изопротурона 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,2 см основного раствора 1 и доводят объем до метки подвижной фазой 1.

7.3.3. Раствор № 2 с концентрацией изопротурона 0,75 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 вносят 7,5 см3 раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой 1.

7.3.4. Раствор № 3 с концентрацией изопротурона 0,5 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 5 см3 раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой 1.

7.3.5. Раствор № 4 с концентрацией изопротурона 0,2 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 2,0 см3 раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой 1.

7.3.6. Раствор № 5 с концентрацией изопротурона 0,1 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 1 см3 раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой 1.

7.3.7. Раствор № 6 с концентрацией изопротурона 0,05 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,5 см3 раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой 1.

7.3.8. Раствор № 7 с концентрацией дифлюфеникана 1,0 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,2 см3 основного раствора 2 и доводят объем до метки подвижной фазой 2.

7.3.9. Раствор № 8 с концентрацией дифлюфеникана 0,75 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 вносят 7,5 см3 раствора 6 и доводят объем до метки подвижной фазой 2.

7.3.10. Раствор № 9 с концентрацией дифлюфеникана 0,5 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 вносят 5,0 см раствора 6 и доводят объем до метки подвижной фазой 2.

7.3.11. Раствор № 10 с концентрацией дифлюфеникана 0,2 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 вносят 2,0 см раствора 6 и доводят объем до метки подвижной фазой 2.

7.3.12. Раствор № 11 с концентрацией дифлюфеникана 0,1 мкг/см3: в мерную колбу вместимостью 10 см3 вносят 1,0 см раствора 6 и доводят объем до метки подвижной фазой 2.

Основные растворы 1 и 2 можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4 °С в течение 1 месяца, градуировочные растворы - в течение суток.

При изучении полноты определения изопротурона и дифлуфеникана в почве, зерне и соломе зерновых используют ацетонитрильные растворы веществ. Растворы с концентрациями аналитов 1,0 и 10,0 мкг/см3 готовят из основных растворов 1 и 2 с концентрациями изопротурона и дифлюфеникана 0,5 мг/см3 методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.

7.4. Построение градуировочного графика

Для установления градуировочных характеристик (площадь пика - концентрация изопротурона или дифлуфеникана в растворах) в хроматограф вводят по 10 мм3 градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации изопротурона или дифлуфеникана в градуировочных растворах.

Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочные коэффициенты (K) в уравнении линейной регрессии:

C = KS, где

S - площадь пика градуировочного раствора.

Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.

Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.

Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

С - аттестованное значение массовой концентрации изопротурона или дифлуфеникана в градуировочном растворе в мг/см3,

СК - результат контрольного измерения массовой концентрации изопротурона или дифлуфеникана в градуировочном растворе в мг/см3,

?контр. - норматив контроля градуировочного коэффициента, % (?контр. = 10 % при Р = 0,95).

7.5. Подготовка патронов для твердофазной экстракции

Диапак С16: Непосредственно перед употреблением в два последовательно соединенных патрона вносят сначала 1 см3 ацетонитрила, а затем 1 см3 воды.

Патрон Силикагель 60: Непосредственно перед употреблением через патрон пропускают 2 см3 гексана.

8. Отбор проб и хранение

 

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№ 2051-79 от 21.08.79), а также в соответствии с ГОСТ Р 51592-2000 «Вода. Общие требования к отбору проб»; ГОСТ Р 50436-92 (ИСО 950-79) «Зерновые. Отбор проб зерна»; ГОСТ 28168-89 «Почвы. Отбор проб». Пробы зерна и соломы для определения остатков в урожае хранят в бумажной или тканевой упаковке при комнатной температуре. Для длительного хранения пробы почвы подсушиваются при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву доводят до стандартной влажности, просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, зерно и солому измельчают на лабораторных мельницах.

9. Проведение определения

9.1. Определение изопротурона и дифлюфеникана в воде водоемов

Две аликвоты воды по 50 см3 пропускают отдельно через патроны Диапак С16. Фильтраты отбрасывают. Через каждый патрон пропускают 3 см3 ацетонитрила. Элюаты 1 и 2 собирают по отдельности и упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °С. Сухой остаток 1 растворяют в 0,5 см3 подвижной фазы 1, а сухой остаток 2 - в 0,5 см подвижной фазы 2. Первый раствор (10 мм3) вводят в жидкостный хроматограф для определения изопротурона в соответствующих условиях хроматографирования (см. п. 9.3). Второй раствор хроматографируют в условиях соответствующих анализу дифлюфеникана.

9.2. Определение изопротурона и дифлюфеникана в почве, зерне и соломе зерновых

По (20 ± 0,1) г почвы или измельченного на лабораторной мельнице зерна или (5 ± 0,1) г нарезанной ножом соломы помещают в коническую колбу вместимостью 250 см3, прибавляют 10 см3 воды и, спустя 2 - 3 мин, 40 см3 ацетона. Экстрагируют на ультразвуковой бане в течение 10 мин. Массу фильтруют через бумажный фильтр «красная лента» на воронке Бюхнера. Экстракцию повторяют, используя в качестве экстрагента 50 см3 смеси ацетона и воды в соотношении 4:1. Объединенный экстракт упаривают на вакуумном ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °С до полного удаления ацетона. Водный остаток (около 20 см3) фильтруют через бумажный фильтр «красная лента» и пропускают через два, соединенных последовательно и откон-диционированных по п. 7.5 патрона Диапак С16. Фильтрат отбрасывают. Изопротурон и дифлюфеникан элюируют 4 см3 ацетона. Элюат упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °С, сухой остаток растворяют в 2,0 см3 гексана и количественно переносят в патрон Силикагель 60, откондиционированный гексаном по п. 7.5. Фильтрат отбрасывают. Патрон промывают двумя порциями по 2 см3 гексана и 2 см3 элюента 1. Промывки отбрасывают. Дифлюфеникан элюируют 5 см3 элюента 2 и собирают элюат 1 в отдельную колбу. Патрон промывают 2 см3 элюента 3. Промывку отбрасывают. Изопротурон элюируют 5 см3 элюента 3, собирая отдельно элюат 2. Элюаты 1 и 2 упаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °С. Сухие остатки изопротурона в зерне и соломе растворяют в 1 см3 подвижной фазы 1, а в почве - в 2 см3 подвижной фазы 1. Сухие остатки дифлюфеникана в почве и зерне растворяют в 2 см3 подвижной фазы 2, а остаток дифлюфеникана в соломе в 1 см3 подвижной фазы 2.

9.3. Условия хроматографирования

Ультраэффективный жидкостный хроматограф «ACQUITY» фирмы Waters с быстросканирующим УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка ACQUITY UPLC ВЕН С18 (2,1?100) мм, 1,7 мкм (Waters). Температура колонки (30 ± 1) °С.

Изопротурон: Подвижная фаза 1: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 40:60. Скорость потока элюента: 0,2 см3/мин. Рабочая длина волны УФ-детектора 240 нм. Объем вводимой пробы 10 мм3. Время удерживания изопротурона (4,2 ± 0,1) мин.

Дифлюфеникан: Подвижная фаза 2: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 65:35. Скорость потока элюента: 0,2 см3/мин. Рабочая длина волны УФ-детектора 285 нм. Объем вводимой пробы 10 мм3. Время удерживания дифлюфеникана (4,7 ± 0,1) мин.

Линейные диапазоны детектирования изопротурона и дифлюфеникана сохраняются в интервале концентраций 0,01 - 1,0 мкг/см3.

10. Обработка результатов анализа

 

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание изопротурона и дифлюфеникана в воде (X, мг/дм3), в почве, зерне и соломе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

где Sx - площадь пика изопротурона или дифлюфеникана на хроматограмме испытуемого образца, AU•сек (AU);

K - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;

V - объём пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см3;

Р - навеска анализируемого образца, г; (воды, см3);

f - полнота извлечения изопротурона или дифлуфеникана, приведенная в табл. 2, (%).

Содержание остаточных количеств изопротурона или дифлюфеникана в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.

Пробы, дающие пики большие, чем стандартный раствор изопротурона или дифлюфеникана с концентрацией 1,0 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой 1 или 2, соответственно.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

 

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

где X1 и Х2 - результаты параллельных определений, мг/кг;

r - значение предела повторяемости (r = 2,8?r).

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

 

Результат анализа представляют в виде: (Х ± ?) мг/кг при вероятности Р = 0,95, где

X - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

? - граница абсолютной погрешности, мг/кг.

где ? - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

В случае если содержание аналита менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

содержание изопротурона в зерне менее 0,005 мг/кг, в почве - менее 0,01 мг/кг, дифлюфеникана в пробах почвы и зерна менее 0,01 мг/кг, содержание изопротурона и дифлюфеникана в пробах воды менее 0,001 мг/дм3, а в пробах соломы менее 0,02 мг/кг*

*0,005 мг/кг - предел обнаружения изопротурона в зерне, 0,01 мг/кг - предел обнаружения дифлюфеникана в пробах почвы и зерна, изопротурона в пробах почвы; 0,001 мг/дм3 - предел обнаружения изопротурона и дифлюфеникана в воде, а 0,02 мг/кг - предел обнаружения в пробах соломы.

13. Контроль качества результатов измерений

 

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

Величина добавки Cд должна удовлетворять условию:

Cд = ?л,x + ?л,x' где

±?л,x (±?л,x') - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг; при этом:

?л = ±0,84•?, где

? - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

где ? - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

Результат контроля процедуры Kк рассчитывают по формуле:

Kк = Х' - Х - Сд, где

Х', Х, Сд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.

Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

(1)

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Kк) с нормативом контроля (K).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

|Kк| ? K

(2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

(3)

где Х1 и Х2 - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.

14. Разработчики

 

Долженко В.И., Цибульская И.А., Журкович И.К., Луговкина Н.В., Ковров Н.Г. (ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, Санкт-Петербург).

Методика прошла метрологическую экспертизу (Свидетельство об аттестации № 01.5.04.679) и внесена в Федеральный реестр (ФР.1.31.2011.10036).

 

 

 




Реклама: ;


Самые популярные документы раздела



Рейтинг@Mail.ru Яндекс.Метрика