doc_act

МУК 4.1.268-96 Хроматографическое измерение концентраций В-экзотоксина (турингина-1) в воздухе рабочей зоны

Реклама

  Скачать документ



Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Хроматографическое измерение концентраций В-экзотоксина (турингина-1) в воздухе рабочей зоны

МУК 4.1.268-96



Реклама

Минздрав России

Москва 2000

1. Методические указания по измерению концентрации вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 30) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

2. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны утверждены и. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.

3. Введены впервые.



Реклама

4. Включенные в данный выпуск 74 методики контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТа 12.1.016-79 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ" и ГОСТа Р 1.5-92 п. 7.3.

Методические указания одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта Федеральной комиссии по санитарно-гигиеническому нормированию "Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение" и методбюро п/секции "Промышленно-санитарная химия" Проблемной комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии".

Ответственные исполнители: Г. А. Дьякова, C. И. Муравьева

Исполнители: Г. А. Дьякова, Н. С. Горячев. Л. Г. Макеева, Г. В. Муравьева, Е. М. Малинина, Е. В. Грыжина, Е. Н. Грицун.

УТВЕРЖДЕНО



Реклама

И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора

России - заместителем Главного

государственного санитарного врача

Российской Федерации

Г.Г. Онищенко



Реклама

8 июня 1996 г.

МУК 4.1.268-96

Дата введения: с момента утверждения

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Хроматографическое измерение концентраций В-экзотоксина (турингина-1) в воздухе рабочей зоны



Реклама

МУК 4.1.268-96 Хроматографическое измерение концентраций В-экзотоксина (турингина-1) в воздухе рабочей зоны

C22H35О19N5P

В-экзотоксин - (турингин-1) - биологический препарат применяется в сельском и лесном хозяйстве против колорадского жука, паутинного клеща, хлопковых совок и др. вредителей растений.

Представляет собой порошок от коричневого до светло-бежевого цвета, растворим в воде и не растворим в органических растворителях. Действующим началом турингина является В-экзотоксин, содержание которого в препарате в среднем - ± 1 %. В воздухе находится в виде аэрозоля.

ПДК в воздухе - 1 мг/м3.



Реклама

Характеристика метода

Определение основано на хроматографическом разделении препарата, в тонком слое силикагеля (силуфол-UV 254) с последующим спектрометрическим измерением концентраций.

Отбор проб производится с концентрированием на фильтр АФА-ВП-20.

Нижний предел измерения в анализируемой пробе - 3 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе - 0,06 мг/м3 (при отборе 45 л воздуха).



Реклама

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе - от 0,06 до 2 мг/м3.

Граница суммарной погрешности измерения ± 20 %.

Определению не мешает присутствие полупродуктов производства экзотоксина.

Реактивы, растворы, материалы

Экзотоксин, х.ч.

Пропанол, х. ч.

ГОСТ ТУ 6-09-783-76

Ацетон, ч.

ГОСТ 2603-79

Дистиллированная вода

Основной стандартный раствор № 1 готовят растворением 100 мг экзотоксина в 100 мл дистиллированной воды, получают раствор, содержащий 1 мг/мл экзотоксина.

Стандартный раствор № 2 готовят путем разбавления основного стандартного раствора № 1 или растворением 10 мг экзотоксина в 10 мл дистиллированной воды получают раствор, содержащий 0,1 мг/мл или 100 мг/мл экзотоксина.



Реклама

Срок хранения растворов - 5 суток.

Приготовление рабочих растворов с содержанием экзотоксина 15,05; 50, 100, 300, 500 мкг/мл - (см. табл.).

Приборы, аппаратура, посуда

Аспирационное устройство с реометром

ТУ 64-1-862-77

Фильтры АФА-ВП-20

Фильтродержатели

Фарфоровые чашки диаметром 4-5 см

Баня водяная

Колбы мерные, вместимостью 50 и 100 мл

ГОСТ 1770-74

Микропипетки, вместимостью 0,1-0,2 мл

ГОСТ 20292-74

Микрошприц вместимостью 1 мл

Пластинка для тонкослойной хроматографии размером 150 ? 150 мм (ЧСФР) "Силуфол"-254

Хроматографическая пластинка "Силуфол"

Химические стаканы, вместимостью 50 мл

Хроматографическая камера размером 150 ? 200 или 105 ? 165 мм

ГОСТ 1056-63

Хроматоскоп

Лампа УФ-света (l = 254 мм)

Центрифужные пробирки

Центрифуга на 3000 об/мин, МЛР-1

Пипетки, вместимостью 1, 5, 10 мл

ГОСТ 20-292-74

Спектрофотометр СФ-26 М

Отбор пробы воздуха

Воздух со скоростью 15 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-20, закрепленный в фильтродержателе.

Для определения 1/2 ПДК достаточно отобрать 6 л воздуха. После отбора пробы фильтры складывают загрязненной стороной внутрь, помещают в пакеты и доставляют в лабораторию.

Срок хранения отобранных проб - 5 суток.

Условия анализа

Фильтры с отобранной пробой помещают в химический стакан, затем промывают дважды 2-3 мл дистиллированной воды тщательно отжимают фильтр стеклянной палочкой и сливают в фарфоровую чашку, которую устанавливают на водяную баню. Выпаривают содержимое до сухого остатка и растворяют в 0,2-0,3 мл воды и всю пробу количественно с помощью микропипетки наносят на стартовую линию хроматографической пластинки в одну точку с помощью микропипетки или микрошприца так, чтобы диаметр пятна не превышал 0,5 см. Остаток в чашке еще 2 раза тщательно смывают по 0,1 мл дистиллированной водой и наносят в центр того же пятна. На стартовую линию той же пластинки в различные точки, расположенные друг от друга на расстоянии 2 см, наносят по 0,2 мл рабочих растворов, содержащих 15, 50, 100, 300 и 500 мкг/мл экзотоксина, что соответствует 3; 10; 20; 60; 100 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, которую за 30 мин до хроматографирования заливают смесью: пропанол, ацетон, вода в соотношении 15:5:1. После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см, пластинку вынимают и оставляют на несколько мин до его испарения. Затем под хроматоскопом обнаруживают зоны локализации препаратов, проявляющиеся в виде сине-фиолетовых пятен на голубом фоне с величиной Rf = 0,78 при использовании пластинок "Силуфол"-UV 254. Под УФ-светом (l = 254 нм) зоны локализации препарата проявляется в виде желтоватых пятен на светлом фоне с величиной Rf = 0,68.

Расчет концентраций

Количественное определение проводят путем сравнения площадей пятен стандартных растворов и проб. Между количеством препарата и площадью его пятен на пластинке существует прямая пропорциональная зависимость.

При большом содержании препарата в пробе следует использовать для анализа меньшую часть анализируемого экстракта.

Содержание экзотоксина (С) в воздухе (мг/м3) вычисляют по формуле:

, где

а - количество экзотоксина, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;

в - общий объем пробы, мл;

б - объем пробы, взятой для анализа, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

Количественная оценка результатов анализа методом УФ-спектрофотометрирования

Полученные на хроматограмме пятна пробы и стандарта снимают осторожно скальпелем и высыпают слой сорбента в центрифужные пробирки. Затем в пробирки добавляют по 4 мл дистиллированной воды и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5-10 мин.

Недостаточный прозрачный раствор осторожно пипеткой отсасывают в прямоугольные кварцевые кюветы с L = 10 мм и измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 240 нм.

Количественное определение экзотоксина в пробе проводят по калибровочному графику.

Для построения калибровочного графика готовят шкалу стандартов в соответствии с таблицей.

Таблица

Шкала стандартов

№ стандарта

Стандартный р-р № 1, 1 мл - 100 мкг

Стандартный р-р № 2, 1 мл - 1000 мкг

Дистиллированная вода, мл

Рабочие р-ры, мкг/мл

Содержание экзотоксина в анализируемой пробе (0,2 мл), мкг

1

0

-

0

0

0

2

1,5

-

8,5

15

3

3

5,0

-

5,0

50

10

4

-

1

9,0

100

20

5

-

3

7,0

300

60

6

-

5

5,0

500

100

Стандартные растворы наносят на чистую хроматографическую пластинку и обрабатывают аналогично пробам.

Измеряют величину оптической плотности стандартных растворов на спектрофотометре при длине волны 240 мм и по полученным средним данным из пяти определений строят калибровочный график "количество препарата (мкг) - оптическая плотность".

Концентрацию экзотоксина (мг/м3) воздуха (X) вычисляют по формуле:

, где

А - количество экзотоксина, найденное в анализируемом объеме пробы по калибровочному графику, мкг;

V - анализируемый объем воздуха, приведенного к нормальным условиям, л.

Методические указания разработаны НИИ гигиены труда и профзаболеваний, г. Ташкент.

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температуре 20 °С и давление 760 мм рт. ст.)

Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по формуле:

, где

Vt - объем воздуха, отобранного для анализа, л;

Р - барометрическое давление, мм рт. ст. (760 мм рт. ст. = 101,33 кПа);

t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета Vст следует пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °С и давлению 760 мм рт. ст. (101,33 кПа) надо умножить Vtна соответствующий коэффициент.

Приложение 2

Коэффициент К для приведения объема воздуха к стандартным условиям

Давление Р, кПа/мм рт. ст.

730

734

738

742

746

750

754

758

760

764

-30

1,1582

1,1646

1,1709

1,1772

1,1836

1,1899

1,1963

1,2026

1,2058

1,2122

-26

1,1393

1,1456

1,1519

1,1581

1,1644

1,1705

1,1768

1,1831

1,1862

1,1925

-22

1,1212

1,1274

1,1336

1,1396

1,1458

1,1519

1,1581

1,1643

1,1673

1,1735

-18

1,1036

1,1097

1,1158

1,1218

1,1278

1,1338

1,1399

1,1400

1,1490

1,1551

-14

1,0866

1,0926

1,0986

1,1045

1,1105

1,1164

1,1224

1,1284

1,1313

1,1373

-10

1,0701

1,0760

1,0819

1,0877

1,0986

1,0994

1,1053

1,1112

1,1141

1,1200

-6

1,0540

1,0599

1,0657

1,0714

1,0772

1,0829

1,0887

1,0945

1,0974

1,1032

-2

1,0385

1,0442

1,0499

1,0556

1,0613

1,0669

1,0726

1,0784

1,0812

1,0869

0

1,0309

1,0366

1,0423

1,0477

1,0535

1,0591

1,0648

1,0705

1,0733

1,0789

+2

1,0234

1,0291

1,0347

1,0402

1,0459

1,0514

1,0571

1,0627

1,0655

1,0712

+6

1,0087

1,0143

1,0198

1,0253

1,0309

1,0363

1,0419

1,0475

1,0502

1,0557

+10

0,9944

0,9999

1,0054

1,0108

1,0162

1,0216

1,0272

1,0326

1,0353

1,0407

+14

0,9806

0,9860

0,9914

0,9967

1,0027

1,0074

1,0128

1,0183

1,0209

1,0263

+18

0,9671

0,9725

0,9778

0,9880

0,9884

0,9936

0,9989

1,0043

1,0069

1,0122

+20

0,9605

0,9658

0,9711

0,9783

0,9816

0,9868

0,9921

0,9974

1,0000

1,0053

+22

0,9539

0,9592

0,9645

0,9696

0,9749

0,9800

0,9853

0,9906

0,9932

0,9985

+24

0,9475

0,9527

0,9579

0,9631

0,9683

0,9735

0,9787

0,9839

0,9865

0,9917

+26

0,9412

0,9464

0,9516

0,9566

0,9618

0,9669

0,9721

0,9773

0,9799

0,9851

+28

0,9349

0,9401

0,9453

0,9503

0,9655

0,9605

0,9657

0,9708

0,9734

0,9785

+30

0,9288

0,9339

0,9891

0,9440

0,9432

0,9542

0,9594

0,9645

0,9670

0,9723

+34

0,9167

0,9218

0,9268

0,9318

0,9368

0,9418

0,9468

0,9519

0,9544

0,9595

+38

0,9049

0,9099

0,9149

0,9198

0,9248

0,9297

0,9347

0,9397

0,9421

0,9471




Реклама: ;


Самые популярные документы раздела



Рейтинг@Mail.ru Яндекс.Метрика